مطالعه اثر باکتری های محرک رشد گیاهی بر ریشه زایی و سازگاری گیاه پپرومیا : پایان نامه ارشد کشاورزی بیوتکنولوژی
کشور عزیزمان ایران با توجه به تنوع اقلیم ، آب و هوای مطبوع و اراضی وسیعی که در اختیار دارد در صورت مدیریت در عرصه کشاورزی میتواند یکی از قطب های بلامنازع کشاورزی دنیا باشد و با پرورش دانش آموختگان خبره در گرایش های مختلف رشته کشاورزی میتوان به این مهم نایل آمد.دیجی لود در ادامه به معرفی پایان نامه های کارشناسی ارشد رشته کشاورزی میپردازد. پایان نامه حاضر با عنوان” مطالعه اثر باکتری های محرک رشد گیاهی بر ریشه زایی و سازگاری گیاه پپرومیا ” با گرایش بیوتکنولوژی و با فرمت Word (قابل ویرایش) تقدیم شما دانشجویان عزیز میگردد.
چکیده مطالعه اثر باکتری های محرک رشد گیاهی بر ریشه زایی و سازگاری گیاه پپرومیا:
باکتریهای محرک رشد گیاهی به عنوان یکی از راههای افزایش رشد گیاه شناخته میشوند. امکان استفاده از این موجودات در تحقیقات آزمایشگاهی گیاهی از جمله کشت بافت گیاهی هنوز در حال بررسی است. با توجه به اینکه این میکروارگانیزمها انواع مواد (از جمله اكسين، سيتوكينين، جيبرلين و سیدروفورها) را به محیط اضافه میکنند، احتمال اینکه بر روی مراحل مختلف کشت بافت از ایجاد کالوس تا مرحله انتقال به خاک اثرات مثبتی داشته باشند وجود دارد.
هدف از این تحقیق بررسی اثرات دو باکتری محرک رشد گیاهی بر روی تکثیر گیاه پپرومیا از طریق کشت بافت بود. آزمایش به صورت طرح فاکتوریل در قالب طرح پایه کاملا تصادفی با سه تکرار اجرا شد. فاکتور باکتری محرک رشد شامل سطوح: 0: شاهد (بدون باکتری)، 2: Azospirillum lipoferrum، 3:Pseudomonas fluorescent و فاکتور هورمون شامل: 0: بدون هورمون، 1: سطح هورمون برابر با 5/1 میلیگرم در لیتر IAA و 1 میلیگرم در لیتر 2IP و 2: مقدار هورمون دو برابر غلظت قبلی بودند. قبل از کشت مقدار 08/0 میلی لیتر از کشت مایع باكتريها، بر روی محیط کشت تلقیح شد و سپس جوانه های پپرومیا در محیطهای مذکور کشت شدند. بعد از گذشت 4 هفته از کشت، جوانه های کشت شده گیاه پپرومیا به اندازه کافی رشد کرده و قابل انتقال به خاک شدند. قبل از انتقال گیاهچه های جوان به گلدان و بعد از طی کردن مراحل سازگاری اندازهگیری صفات مورد نظر انجام شد.
نتایج نشان داد در آزمایش درون شیشهای اثر متقابل هورمون و باکتری بر کل طول ریشه و میانگین طول ریشه معنیدار بود. تیمارAzospirillum بدون هورمون دارای بیشترین طول ریشه بود و اختلاف معنی دار با دیگر تیمارها داشت. اثر اصلی باکتری بر طول ساقه و تعداد برگ معنیدار بود. مشاهده شد تلقیح ریزنمونه ها با هر دو باکتری نسبت به شاهد باعث افزایش معنی دار طول متوسط شاخه های باززا شده گردید. افزایش طول ساقه در تیمارهای باکتری نسبت به شاهد در حدود 5/1 برابر بود. در مرحله سازگاری، اثرمتقابل هورمون و باکتری بر تعداد برگ، توسعه برگی و وزن خشک و اثر باکتری بر وزن تر و اثر هورمون بر کل طول ریشه و وزن خشک معنیدار بود. در کل تلقیح با باکتری تاثيرات مثبتی بر تعداد برگ، توسعه برگی، طول شاخه و طول ریشه داشت. ولی تاثیر منفی تلقیح باکتری بر وزن تر و خشک مشاهده گردید. افزایش سطح هورمون تاثیر مثبت بر طول کل طول ریشه داشت.
گیاهشناسی پپرومیا
گیاه پپرومیا (برگ قاشقی) از جنسPeperomia و خانواده Piperaceae میباشد. این جنس دارای بیش از ۱۰۰۰ گونه مختلف از گیاهان همیشه سبز بالارونده است که اغلب آنها برگهای زیبایی دارند. گونه مذکور بومی نواحی استوایی آمریکا بوده و گیاهی است بسیار کم رشد که ارتفاع آن به حدود ۸ تا ۲۵ سانتیمتر ميرسد. برگهای آن بسیار زیاد و قلبی شکل میباشند که از قسمت مرکزی گیاه خارج میشوند. برگهای پپرومیا صورتی کمرنگ میباشد. گلها به رنگ سفید و به شکل گل آذین سنبله مانند و به طول ۱۲ تا ۱۵ سانتیمتر هستند و از اوایل بهار تا اواخر پاییز به چشم میخورند. این گیاه به نور متوسط، حرارت زیاد، خاک همیشه مرطوب، رطوبت ۵۰ تا ۹۰ درصد و خاک قلیایی احتیاج دارد. کود مورد نیاز این گیاه را میتوان به میزان ۲ گرم در لیتر، هر دو هفته یکبار از فروردین تا مهرماه، مورد استفاده قرار داد (کریمی، 1390).
نگهداری گیاه پپرومیا
پپرومیا گیاهی است گرمسیری با برگهای چرمی شکل و قاشقی (شکل1-1)، این گیاه دارای نیاز آبی کم (بسته به شرایط محیط) میباشد، و همچنین نیاز نوری کمی دارد و سایه آپارتمان را به خوبی تحمل میکند، هم بصورت مجزا و هم در کاشت گروهی زیباست. این گیاه اگرچه رشد سریعی ندارد، ولی در هر شرایطی در آپارتمان پرورش مییابد. معمولا آنها را در تراریوم و باغ شیشهای یا مجموعهی گلهای یک سبد پرورش میدهند. با توجه به شکل ظاهری و نحوهی رشد آنها را به سه گروه تقسیم نمودهاند: گروه اول: بوتهای که دارای دمبرگهای قرمز هستند، بعضی نیز برگهای گوشتی و قلبی شکل دارند، گروه دوم: دارای ساقه های بلند و قرمز رنگ هستند و بعضی ساقه های گوشتی دارند و لبه برگها ارغوانی است و گاه سطح برگ با موهای بسیار ظریفی پوشیده شده است. گروه سوم: گروه بالارونده که به داربست یا قیم بسته میشوند و بالا میروند، با اینکه از گلدان آویزان میشوند و دارای ساقه های قرمز و بسیار ظریف نقرهای و بعضی دارای برگهای سبز آبدار هستند و بخصوص برای گلدانهای آویز بسیار مناسبند.
گیاه پپرومیا یک ساقه گلدهنده با شاتونهای سبز رنگ تولید میکند که ارزش زینتی ندارد، زمانی که این گیاه به گل میرود، کیفیت برگها و زیبایی آن کمتر میشود، با حذف ساقه های گلدهنده میتوان گیاه را مرتب به حالت رویشی و نونهالی مشاهده کرد. این گیاه به سرمای زیاد مقاومت ندارد و حداکثر میتواند در زمستان 15 درجه سانتیگراد را تحمل نماید و در فصل رشد دمای 24 تا 30 درجه برای آن بسیار مناسب است. این گیاه در زیر تابش اشعه فلورسنت پژمرده میشود و نیاز چندانی به آب ندارد و همیشه مقدار زیادی آب در برگهای آن وجود دارد و سطح خاک گلدان بین دو آبیاری باید کاملا خشک شود، ولی نباید آبیاری آنقدر به تعویق افتد که برگها پژمرده شوند. در زمستان به آب ولرم نیاز دارد و مقدار آبیاری باید بسیار کمتر باشد، ریشه آن سطحی است و گسترش چندانی ندارد و در هوای آلوده، زرد و خشک میشود، در صورت آب دادن زیاد اطراف یقه ساقه، موجب پوسیدگی اطراف آن میشود. میزان رطوبت هوای لازم برای این گیاه حدود 50 درصد است، چنانچه رطوبت و حرارت و سرما از حد خود تجاوز کند، لکه هایی بر سطح برگ ظاهر میشوند، برگ را بیحس میکنند و میافتد. هر دوماه یکبار سطح خاک گلدان را باید خراش داد تا هوا به داخل آن نفوذ کند و در فصل بهار گلدان را در فضای آزاد در محلی سایه قرار دهید تا حالت طبیعی خود را به دست آورد. هر اندازه قابلیت نفوذ خاک این گیاه بیشتر باشد ریشه و ساقه از پوسیدگی محفوظ خواهد بود. بهتر است برای تهیه خاک گلدان این گیاه یک قسمت پیت بعلاوه یک قسمت ماسه به همراه یک قسمت خاک باغچه استفاده شود و کف گلدان مقداری ماسه و سنگریزه بریزید، زمان مناسب برای تغییر گلدان این گیاه فصل بهار است. پپرومیای ابلق یا سفید با قلمه های بذر و ساقه تکثیر میشود و پپرومیای سبز با قلمههای برگ و ساقه تکثیر میشود. بهتر است در بهار و تابستان از قلمه های یک ساله برای گیاه استفاده نمود و برای این کار قلمه را به میزان 4 تا 5 سانتیمتر در ماسه شسته فرو برده و در محلی که دمای آن 18 درجه باشد در تاریکی قرار میدهند. در مورد انواع گوشتی آن برگ را روی سطح ماسه خوابانیده و روی آن ماسه شسته میريزند، پس از مدتی در انتهای رگبرگها ریشه ظاهر میشود (کریمی، 1390).
اهداف تحقیق
هدف از این تحقیق، بررسی اثر استفاده از باکتریهای محرک رشد گیاهی در محیط کشت درون شیشهای و نقش باکتریها در رشد و توسعه گیاه پپرومیا بود. این باکتریها قبلا در محیطهای کشت خاکی و نیز سایر محیطهای کشت طبیعی استفاده شده و نتایج آن منتشر گردیده بود. ولی کاربرد آن در شرايط کشت بافت در موارد اندکی انجام شده است. گیاه پپرومیا به عنوان یک گیاه گرمسیری با رشد کم نمونه خوبی برای بررسی اثر این باکتریها بر این گیاه و سایر گیاهان مشابه میباشد.
فهرست مطالب
فصل اول: کلیات تحقیق.. 2
1-1 گیاهشناسی پپرومیا 2
1-2 نگهداری گیاه پپرومیا 2
1-3 نقش کشت بافت در تکثیر گیاهان. 3
1-4 ترکیبات محیطهای کشت.. 5
1– 4 – 1 مواد غیر آلی.. 6
1– 4– 2 منبع کربن.. 6
1 – 4 – 3 ویتامینها 6
1 – 4 – 4 آمینواسیدها و مکملهای آلی.. 7
1 – 4- 5 تنظیم کنندههای رشد گیاهی.. 7
1 – 4 – 6 عامل ژلهای کننده 7
1– 4 – 6 – 1 آگار. 7
1-5 ظروف کشت.. 8
1 – 6 انتخاب و تهیه ریزنمونه. 8
1 – 7 ریزازدیادی.. 8
1-8 کودهای زیستی.. 9
1-9 باکتریهای محرک رشد گیاه (PGPRها) 9
1-10 مکانیسم عمل PGPR ها 11
1-10-1 نقش مستقيم PGPRها 12
1-10-2 نقش غيرمستقيم PGPRها 13
1-11 اهداف تحقیق. 13
فصل دوم: مروری بر تحقيقات انجام شده. 15
2– 1 سوابق استفاده از PGPR در کشت بافت سایر گیاهان. 15
2– 2 سوابق استفاده از PGPR در کشاورزی.. 15
فصل سوم: مواد و روشها 22
3 – 1 محل انجام آزمایش… 22
3 – 2 تهیه گیاه مادری.. 22
3-3 تهیه و واکشت سویه های باکتریایی.. 22
3-4 ترکیبات و ساخت محیط کشت.. 23
3-5 ضدعفونی ریزنمونه های گیاهی پپرومیا 24
3-6 شرایط کشت ریزنمونه ها 26
3-7 کشت اولیه. 26
3-8 آزمایش بررسی اثر استفاده از تیمارهای مختلف گندزدایی در جلوگیری از آلودگی در کشت بافت گیاه پپرومیا 26
3-9 بررسی تاثیر افزایش غلظت فسفر بر اندامزایی پپرومیا 27
3-10 اثر سطوح مختلف ساکارز بر اندامزایی پپرومیا 28
3-11 تاثیر سطوح هورمونی و تلقیح با باکتری بر رشد ریزنمونه جوانه جانبی درون شیشه. 28
3- 12 تاثیر تلقیح با باکتری بر سازگاری گیاهان تکامل یافته در گلدان. 29
3-13 صفات اندازهگيري شده 30
3-13-1 میانگین تعداد برگ در هر بوته. 30
3-13- 2 ارتفاع ساقه. 30
3-13-3 تعداد ریشه در هر بوته. 30
3-13-4 طول کل ریشه. 30
3-13-5 تعداد جوانه جانبي.. 30
3-13-6 توسعه برگي.. 30
3-13-7 وزن تر بوته. 31
3-13-8 وزن خشک بوته. 31
3-14 تجزیه آماری.. 31
فصل چهارم: نتايج و بحث.. 32
4-1 مقدمه. 32
4-2 بررسی اثر استفاده از تیمارهای مختلف گندزدایی در جلوگیری از آلودگی در کشت بافت گیاه پپرومیا 32
4– 3 بررسی تاثیر افزایش غلظت فسفر بر اندامزایی پپرومیا 33
4-4 اثر سطوح مختلف ساکارز بر اندامزایی پپرومیا 34
4-5 تاثیر سطوح هورمونی و تلقیح با باکتری بر رشد ریزنمونه جوانه جانبی درون شیشه (2 هفته بعد از كشت) 34
4-5-1 تعداد برگ.. 35
4-5-2 طول ساقه باززا شده 36
4-5-3 تعداد ريشه باززا شده 37
4-5-4 کل طول ریشه باززا شده 37
4-5-5 ميانگين طول ریشه. 38
4-5-6 تعداد جوانه رشد كرده 39
4-5-7 توسعه برگي.. 39
4-6 تاثیر سطوح هورمونی و تلقیح با باکتری بر رشد ریزنمونه جوانه جانبی درون شیشه (چهار هفته بعد از كشت) 41
4-6-1 تعداد برگ.. 41
4-6-2 طول ساقه. 42
4-6-3 تعداد ريشه. 43
4-6-4 کل طول ریشه باززا شده 44
4-6-5 ميانگين طول ریشه. 46
4-6-6 تعداد جوانه رشد كرده 47
4-6-7 توسعه برگي.. 47
4-7 تاثیر سطوح هورمونی و تلقیح با باکتری بر رشد گیاهچه های کشت بافتی پپرومیا در مرحله سازگاری.. 47
4-7-1 تعداد برگ.. 48
4-7-2 طول ساقه. 49
4-7-3 تعداد ريشه. 49
4-7-4 کل طول ریشه. 49
4-7-5 ميانگين طول ریشه. 50
4-7-6 توسعه برگي.. 50
4-7-7 وزن تر بوته. 51
4-7-8 وزن خشک بوته. 52
4-8 اندامزایی مستقیم در گیاه پپرومیا 53
فصل پنجم: نتيجه گيری.. 54
5-1 بحث.. 54
5-2 نتایج.. 56
5-3 پیشنهادات.. 57
منابع.. 58
فهرست جداول:
جدول 3-1 مقادیر قند به کار رفته در محیط کشت 30
جدول 4-1 نتایج تجزیه واریانس اثر تیمارهای مختلف ضدعفونی در جلوگیری از آلودگی ریزنمونه در کشت بافت پپرومیا 35
جدول 4-2 خلاصه تجزیه واریانس اثر سطوح مختلف هورمون و باکتری بر صفات مربوط به رشد درون شیشه ای ریزنمونه جوانه جانبی پپرومیا 38
جدول 4-3 خلاصه تجزیه واریانس اثر سطوح مختلف هورمون و باکتری بر صفات مربوط به رشد درون شیشه ای ریزنمونه جوانه جانبی گیاه پپرومیا (تاریخ دوم 44
جدول 4-4 خلاصه تجزیه واریانس سطوح مختلف هورمون و باکتری بر صفات مربوط به رشد گیاهچه های کشت بافتی پپرومیا در مرحله سازگاری 51
فهرست نمودارها:
نمودار4-1 درصد بروز آلودگی ریزنمونه تحت تیمارهای مختلف ضدعفونی در کشت بافت گیاه پپرومیا …. 36 نمودار 4-2 اثر تیمار باکتری بر تعداد برگ گیاه پپروميا درون شیشه 39 نمودار 4-3 اثر تیمار باکتری بر طول ساقه باززا شده گیاه پپروميا 40 نمودار 4-4 اثرمتقابل سطوح هورمون و باکتری بر كل طول ریشه در گیاه پپروميا درون 41 نمودار 4-5 اثرمتقابل سطوح هورمون و باکتری بر ميانگين طول ریشه در گیاه پپروميا درون شیشه 42 نمودار 4-6 اثرمتقابل سطوح هورمون و باکتری بر تعداد برگ گیاه پپروميا درون شیشه (تاريخ دوم 45 نمودار 4-7 اثر سطوح هورمون بر طول ساقه باززا شده گیاه پپروميا (تاريخ دوم) 46 نمودار 4- 8 اثر سطوح هورمون بر تعداد ريشه باززا شده گیاه پپروميا (تاريخ دوم) 47 نمودار 4-9 اثر تيمار باكتري بر تعداد ريشه باززا شده گیاه پپروميا (تاريخ 47 نمودار 4- 10 اثر سطوح هورمون بر كل طول ريشه باززا شده گیاه پپروميا (تاريخ 48 نمودار 4- 11 اثر تيمار باكتري بر كل طول ريشه باززا شده گیاه پپروميا (تاريخ دوم 49 نمودار 4- 12 اثر سطوح هورمون بر ميانگين طول ريشه باززا شده گیاه پپروميا (تاريخ دوم 50 نمودار 4- 13 اثرمتقابل سطوح هورمون و باکتری بر تعداد برگ گیاه پپروميا در مرحله سازگاري 52 نمودار 4 -14 اثر سطوح هورمون بر طول كل ريشه گیاه پپروميا در مرحله سازگاري 53 نمودار 4- 15 اثرمتقابل سطوح هورمون و باکتری بر توسعه برگ گیاه پپروميا در مرحله سازگاري 54 نمودار 4- 16 اثر تیمار باکتری بر وزن تر گیاه پپروميا در مرحله سازگاري 55 نمودار 4- 17 اثرمتقابل سطوح هورمون و باکتری بر وزن خشك گياه پپروميا در مرحله سازگاري 56 |
فهرست شکلها:
شکل 1-1 گیاه پپرومیا (برگ قاشقی) 5 شکل 3-1 قرار دادن باکتریها بر روی شیکر جهت تهیه مایع تلقیح 25 شکل 3-2 ساخت محیط کشت و تنظیم pH محیط کشت 26 شکل 3-3 انجام آبشویی قبل از استفاده از مواد شیمیایی برای ضدعفونی 27 شکل 3-4 شیشه های حاوی ریز نمونه پپرومیا 27 شکل 3-5 نگهداری ریز نمونه ها در شرایط مطلوب ایجاد شده در اتاق رشد 28 شکل 3-6 گیاهچه های پپرومیای کشت بافتی منتقل شده به گلدان 32 شکل 4-1ریزنمونه كشت شده در آزمایش فسفات 37 شکل 4-2 ريشه هاي ايجاد شده بر روي ريزنمونه برگی گیاه پپرومیا 38 شکل 4-3 ریزنمونه ریشه دار شده پپرومیا در محیط تلقیح شده با باکتری 43 شکل 4-4 ريزنمونه پپرومیا تلقیح شده با تیمار باکتریایی محرک رشد 43 شکل 4-6 اندام زایی مستقیم قطعات برگی گیاه پپرومیا (ریشهزایی) 60 |
راهنمای خرید و دانلود فایل
برای پرداخت، از کلیه کارتهای عضو شتاب میتوانید استفاده نمائید.
بعد از پرداخت آنلاین لینک دانلود فعال و نمایش داده میشود ، همچنین یک نسخه از فایل همان لحظه به ایمیل شما ارسال میگردد.
در صورت بروز هر مشکلی،میتوانید از طریق تماس با ما پیغام بگذارید و یا در تلگرام با ما در تماس باشید، تا شکایت شما مورد بررسی قرار گیرد.
برای دانلود فابل روی دکمه خرید و دانلود کلیک نمایید.
ديدگاه ها