اثرات اوکالیپتول بر الگوی فعالیت نورونی حلزون و برهمکنش با مکانیسم های سلولی دخیل در القای فعالیت صرعی : پایان نامه ارشد زیست شناسی گرایش فیزیولوژی جانوری
سری جدیدی از پایان نامه های رشته زیست شناسی در گرایش های مختلف آن را برای دانلود کاربران و دانشجویان دانشکده های علوم پایه قرار میدهیم . پایان نامه حاضر با عنوان اثرات اوکالیپتول بر الگوی فعالیت نورونی حلزون و برهمکنش با مکانیسم های سلولی دخیل در القای فعالیت صرعی در گرایش زیست شناسی علوم جانوری – فیزیولوژی جانوری با فرمت ورد (قابل ویرایش) معرفی میگردد.
چکیده تحقیق اثرات اوکالیپتول بر الگوی فعالیت نورونی حلزون و برهمکنش با مکانیسم های سلولی دخیل در القای فعالیت صرعی :
اوكاليپتول یک مونوترپن است که در اسانس روغنی بسیاری از گیاهان از جمله گیاه اوکالیپتوس وجود دارد. این ترکیب اثرات فارماکولوژیک متنوعی نشان میدهد که بسیاری از آنها برهمکنش مستقیم یا غیر مستقیم با کانالهای یونی را بکار میگیرد. در این تحقیق تاثیر اکالیپتول بر تحریک پذیری نورونهای کانگلیون زیرمری حلزون Caucasotachea atrolabiata با استفاده از تکنیک ثبت داخل سلولی مطالعه شد. اوکالیپتول (3 میلی مولار) پس از حدود 5 دقیقه، منجر به افزایش فرکانس پتانسیلهای عمل و کاهش دامنه و مدت پتانسیل متعاقب هیپرپلاریزان گردید که میتواند بیانگر مهار جریانهای پتاسیمی رو به خارج باشد. اعمال دارو در غلظت بالاتر (mM5) سبب تغییر الگوی فعالیت نورون از حالت منظم به فعالیت انفجاری به همراه انحراف دپلاریزان گردید که این تغییرات بعد از شستشو با رینگر نرمال برگشت پذیر بود.
اعمال اوکالیپتول 3 میلی مولار پس از کاربرد مهارکنندههای سنتتیک کانالهای پتاسیمی، تترااتیلآمونیوم (مهارکننده کانالهای پتاسیمی جبرانکننده تأخیری) و 4-آمینوپیریدین (مهار کننده کانالهای پتاسیمی سریع) منجر به القای فعالیت انفجاری شد که از عملکرد همسوی اوکالیپتول با این عوامل حمایت میکند. فعالیت انفجاری و انحراف دپلاریزان در حضور نیفدیپین (مهارکننده کانالهای کلسیمیL-type) و نیکل کلراید (مهارکننده غیراختصاصی کانالهای کلسیمی) حذف شد که میتواند بیانگر نقش جریانهای کلسیمی رو به داخل در تعدیل فعالیت نورونی توسط اکالیپتول باشد. H89 (مهار کننده پروتئین کیناز وابسته بهcAMP ) و کلریترین (مهارکننده پروتئین کینازC) قادر به مهار قابل توجه فعالیت انفجاری و انحراف دپلاریزان نبودند که نشان میدهند فعالیت صرعی القاء شده توسط اکالیپتول به فسفوریله شدن کانالها وابسته نیست. نتایج تحقیق حاضر نشان میدهد که به احتمال زیاد اوکالیپتول بواسطهی مهار مستقیم کانالهای پتاسیمی تحریکپذیری نورونها را افزایش میدهد.
کلمات کلیدی: اوکالیپتول، نورون حلزون، فعالیت انفجاری، انحراف دپلاریزان، کانالهای یونی
بیان مساله
بيماري صرع از جمله شايعترين اختلالات عصبي در جهان است. این اختلال بصورت تشنجات خودبخوديِ غيرقابل پيشبینی بروز مي کند. صرع معمولاً در نتیجه کاهش عوامل مهاری یا افزایش شدید تحریکپذیری در بخشي از شبکه نورونی مغز رخ میدهد. در چنین شرایطی الگویی از فعالیت غیرطبیعی و شدید موسوم به الگوی فعالیت صرعی در این مجموعه نورونی شروع میشود (Fisher, 1989).
تغییر در الگوی فعالیت سیناپسها و اختلال در عملکرد کانالهای یونی بعنوان دو مکانیسم اساسی زمینه ساز صرع شناخته شده اند (Noebels, 2003; .Wuttke and Lerche, 2006) شواهد متعددی تغییر در سیستمهای نوروترنسمیتری مختلف بویژه گلوتامات، آسپارتات و GABA در ایجاد زمینه صرع را تایید کرده اند (Pinto et al., 2005) با این حال شواهدی وجود دارد که تاثیر انحصاری سیناپسها در ایجاد زمینه و بروز صرع را نقض میکنند.
برخی تک سلولهای کشت داده شده بیمهرگان و مهره داران قادر به تولید الگوی فعالیت صرعی هستند (Rosalin, 1991). همچنین مهار انتقال سیناپسی با غلظت بالای منیزیم و غلظت پایین کلسیم در مواردی قادر به مهار فعالیت صرعی نیست (Bikson et al., 1999). مدارکی از این دست اهمیت و نقش ویژگیهای ذاتی غشاء بویژه عملکرد کانالهای سدیمی، پتاسیمی و کلسیمی در بروز الگوی صرع را نشان میدهند.
و…
فهرست مطالبتحقیق اثرات اوکالیپتول بر الگوی فعالیت نورونی حلزون
فصل اول: مقدمه
1-1) بیان مساله ……………………………………………………..2
1-2) دلایل استفاده از نورونهای حلزون ……………………………… 6
فصل دوم: مروری بر تحقیقات پیشین
2-1) صرع …………………………………………………………. 9
2-2) اسانسهای گیاهی …………………………………………….. 10
2-3) اثرات بیولوژیک اسانسهای گیاهی ………………………………………….. 12
2-4) ترکیبات اسانسها و عملکرد آنها روی سیستم عصبی مرکزی و محیطی ………… 12
2-4-1) کامفر ……………………….. 13
2-4-2) منتول ………………………………………………………… 13
2-4-3) لینالول ……………………………………….. 14
2-4-4) اوکالیپتول ……………………………………………….. 15
2-5) کانالهای یونی و مشارکت آنها در فعالیت الکتریکی نورونها ……………………. 17
2-5-1) کانالهای کلسیمی …………………………….. 18
2-5-2) کانالهای پتاسیمی ……………………… 20
2-5-2-1) کانالهای پتاسیمی وابسته به ولتاژ …………………………. 21
2-5-2-2) کانالهای پتاسیمی وابسته به کلسیم ……………………….. 21
2-5-3) کانالهای سدیمی ……………………………………….. 23
2-5-3-1) جریانهای سدیمی گذرا و مداوم …………………………….. 23
2-6) پروتئین کینازها و تنظیم کانالهای یونی توسط فسفوریلاسیون ………………….. 24
2-6-1) PKA و اثر بر کانالهای یونی …………………… 25
2-6-2) PKC و اثر بر کانالهای یونی ……………….. 26
فصل سوم: مواد و روشها
3-1) حیوانات ……………………. 29
3-2) تشریح و آماده سازی گانگلیون عصبی جهت ثبت ……………….. 30
3-3) محلولها و داروها ……………………………. 31
3-4) ثبت داخل سلولی …………………………… 31
3-5) مراحل آزمایش ……………………. 33
3-6) پارامترهای الکتروفیزیولوژیک مورد مطالعه ……………….. 33
3-7) آزمون آماری ……………………………….. 35
فصل چهارم: نتایج
4-1) ویژگیهای فعالیت خودبخودی و برانگیخته نورونهای حلزون در شرایط کنترل ……… 37
4-2) ویژگیهای پتانسیل عمل خودبه خودی نورونهای حلزون در حضور غلظت 3 میلی مولار اوکالیپتول ……… 38
4-3) ویژگیهای پتانسیل عمل خودبه خودی نورونهای حلزون در حضور غلظت 5 میلی مولار اوکالیپتول ………… 44
4-4) ویژگیهای پتانسیل عمل خودبخودی در حضور اوکالیپتول 3 میلی مولار و PTZ ……. 49
4-5) ویژگیهای پتانسیل عمل خودبخودی در حضور اوکالیپتول 3 میلی مولار و مهار کنندههای کانالهای پتاسیمی 4-AP و TEA
4-6) ویژگیهای پتانسیل عمل خودبخودی در حضور اوکالیپتول 5 میلی مولار و مهار کنندههای کانالهای کلسیمی نیکل کلرید و نیفدیپین …………….. 52
4-7) ویژگیهای پتانسیل عمل خودبخودی در حضور اوکالیپتول 5 میلی مولار و مهار کنندههای پروتئین کینازها کلریترین و H89
فصل پنجم: بحث و نتیجه گیری
5-1) بحث ………………………………………… 58
5-1-1) تغییر در ویژگیهای پتانسیل عمل در حضور اوکالیپتول ……………………….. 59
5-2) نتیجه گیری ……………………………….. 63
5-3) پیشنهادات برای مطالعات آینده …………………… 64
فهرست منابع و ماخذ …………… 65
فهرست شکلها
شکل 3-1. حلزون باغی …………………………….. 29
شکل 3-2. گانگلیون تحت مری تثبیت شده در محفظه ثبت ………………………………… 30
شکل 3-3. نمایی از وسایل ثبت داخل سلولی ……………………………………. 32
شکل 3-4. نحوه اندازه گیری برخی پارامترهای پتانسیل عمل …………………… 34
شکل 4-1. الگوی فعالیت خودبخودی نورون در شرایط کنترل، 5 و 10 دقیقه پس از مجاورت با اوکالیپتول 3 میلی مولار …………. 38
شکل 4-2. مقایسه پتانسیل ثبت شده از یک نورون در سه زمان کنترل، 5 و 10 دقیقه پس از افزودن اوکالیپتول 3 میلی مولار ….. 42
شکل 4-3. الگوی فعالیت خودبخودی در شرایط کنترل، 5 دقیقه پس از مجاورت با غلظت mM 5 اوکالیپتول و پس از شستشوی محفظه حاوی اوکالیپتول با رینگر نرمال حلزون ……. 44
شکل 4-5. پس از افزایش فعالیت نورون درنتیجه افزودنPTZ 10 میلی مولار، افزودن اوکالیپتول 3 میلی مولار بعد از 3 دقیقه منجر به بروز الگوی burst شد …….. 50
شکل 4-6. پس از افزایش فعالیت نورون درنتیجه افزودن TEA 5 میلی مولار، افزودن اوکالیپتول 3 میلی مولار بعد از 5 دقیقه منجر به بروز الگوی burst شد ……… 51
شکل 4-7. پس از افزایش فعالیت نورون درنتیجه افزودن 4-AP 1 میلی مولار، افزودن اوکالیپتول 3 میلی مولار بعد از 4 دقیقه منجر به بروز الگوی burst شد …………. 52
شکل 4-8. پس از بروز فعالیت PDS درنتیجه افزودن اوکالیپتول 5 میلی مولار، NiCl به محفظه ثبت اضافه گردید ……… 53
شکل 4-9. پس از بروز فعالیت PDS در نتیجه افزودن اوکالیپتول 5 میلی مولار، نیفدیپین به محفظه ثبت اضافه گردید ……. 54
شکل 4-10. پس از بروز فعالیت PDS در نتیجه افزودن اوکالیپتول 5 میلی مولار، کلریترین به محفظه ثبت اضافه گردید ………….. 55
شکل 4-11. پس از بروز فعالیت PDS در نتیجه افزودن اوکالیپتول 5 میلی مولار، H89 به محفظه ثبت اضافه گردید ……….. 56
فهرست نمودارها و جدولها
نمودار 4-1. مقایسه میانگین پتانسیل استراحت غشاء، آستانه، فرکانس و دامنه پتانسیل عمل در شرایط کنترل و در 5 و 10 دقیقه پس از افزودن غلظت 3 میلی مولار اوکالیپتول به رینگر حلزونی نرمال (7=n) …………… 39
نمودار 4-2. مقایسه میانگین مدت زمان پتانسیل عمل، فاصله بین پتانسیلهای عمل، و سطح زیر منحنی در شرایط کنترل و در 5 و 10 دقیقه پس از افزودن غلظت 3 میلی مولار اوکالیپتول به رینگر حلزونی نرمال (7=n) ………… 40
نمودار 4-3. مقایسه دامنه AHP و طول مدت AHP در شرایط کنترل و در 5 و 10 دقیقه پس از افزودن غلظت 3 میلی مولار اوکالیپتول به رینگر حلزونی نرمال (7=n) ….41
نمودار 4-4. مقایسه میانگین شیب فاز دپلاریزاسیون و شیب فاز رپلاریزاسیون بین سه حالت کنترل، 5 و 10 دقیقه پس از افزودن اوکالیپتول 3 میلی مولار (7=n) …. 42
نمودار 4-5. مقایسه میانگین مدت دوره مهاری بعد از فعالیت برانگیخته پس از تزریق جریانهای دپلاریزان (nA3-2) در شرایط کنترل و 10 دقیقه پس از افزودن غلظت 3 میلی مولار اوکالیپتول به رینگر حلزونی نرمال …….. 43
نمودار 4-6. مقایسه میانگین پتانسیل استراحت غشاء، آستانه، فرکانس و فاصله بین پتانسیلهای عمل در شرایط کنترل و 5 دقیقه پس از افزودن غلظت 5 میلی مولار اوکالیپتول به رینگر حلزونی نرمال (6=n) ……….. 45
نمودار 4-7. مقایسه دامنه و طول مدت پتانسیلهای عمل و همچنین سطح زیر منحنی در شرایط کنترل و 5 دقیقه پس از افزودن غلظت 5 میلی مولار اوکالیپتول به رینگر حلزونی نرمال (6=n) ……… 46
نمودار 4-8. مقایسه مدت فاز دپلاریزاسیون و رپلاریزاسیون پتانسیل عمل، دامنه AHP و طول مدت AHP در شرایط کنترل و 5 دقیقه پس از افزودن غلظت 5 میلی مولار اوکالیپتول به رینگر حلزونی نرمال (6=n) ………. 47
نمودار 4-9. مقایسه میانگین شیب فاز دپلاریزاسیون و شیب فاز رپلاریزاسیون بین حالت کنترل و 5 دقیقه پس از افزودن اوکالیپتول 3 میلی مولار (7=n) ………. 47
جدول4-1. مقاومت ورودی سلول در شرایط کنترل و 10 دقیقه پس از کاربرد اوکالیپتول 3 میلی مولار …… 43
جدول 4-2. مقاومت ورودی سلول در شرایط کنترل و 10 دقیقه پس از کاربرد اوکالیپتول 5 میلی مولار ………. 49
راهنمای خرید و دانلود فایل
برای پرداخت، از کلیه کارتهای عضو شتاب میتوانید استفاده نمائید.
بعد از پرداخت آنلاین لینک دانلود فعال و نمایش داده میشود ، همچنین یک نسخه از فایل همان لحظه به ایمیل شما ارسال میگردد.
در صورت بروز هر مشکلی،میتوانید از طریق تماس با ما پیغام بگذارید و یا در تلگرام با ما در تماس باشید، تا مشکل مورد بررسی قرار گیرد. دیجی لود متعهد میشود که هر طور شده فایل خریداری شده ، به دست شما خواهد رسید.
برای دانلود فابل روی دکمه خرید و دانلود کلیک نمایید.
ديدگاه ها