تهیه پروتکل ریز ازدیادی و تولید نیمه انبوه دو پایه پا کوتاه کننده گلابی OH×F40 و FOX11 : پایان نامه ارشد مهندسی کشاورزی علوم باغبانی

کشور عزیزمان ایران با توجه به تنوع اقلیم ، آب و هوای مطبوع و اراضی وسیعی که در اختیار دارد در صورت مدیریت در عرصه کشاورزی میتواند یکی از قطب های بلامنازع کشاورزی دنیا باشد و با پرورش دانش آموختگان خبره در گرایش های مختلف رشته کشاورزی میتوان به این مهم نایل آمد.دیجی لود در ادامه به معرفی پایان نامه های کارشناسی ارشد رشته کشاورزی میپردازد. پایان نامه حاضر با عنوان” تهیه پروتکل ریز ازدیادی و تولید نیمه انبوه دو پایه پا کوتاه کننده گلابی OH×F40 و FOX11” با گرایش علوم باغبانی – تولیدات گیاهی – تولید محصولات باغی و با فرمت Word (قابل ویرایش) تقدیم شما دانشجویان عزیز میگردد.

چکیده پایان نامه تهیه پروتکل ریز ازدیادی و تولید نیمه انبوه دو پایه پا کوتاه کننده گلابی OH×F40 و FOX11:

به منظور بررسي ريزازديادي دو پايه پاکوتاه‌کننده گلابي OH×F40 و ‌FOX11،‏ سه آزمايش مجزا صورت پذيرفت. در آزمايش اول اثر سه نوع محيط كشت شامل (MS، QL و QLتغييريافته)، بر روي صفات نسبت پرآوري، ميزان رشد، توسعه برگ‌ها، تعداد برگ‌ها، طول ميانگره و ميزان ظهور سر‌شاخه­هاي نکروزه مورد مقايسه قرار گرفتند. نتايج به دست آمده از جدول تجزيه واريانس نشان داد كه اختلاف معني‌داري از نظر ميزان رشد در محيط درون شيشه‌اي بين دو پايه مورد بررسي وجود دارد، اما اثر محيط کشت روی میزان رشد معني‌دار نشد. همچنین اثر محیط کشت بر روی میزان پرآوری در محیط درون شیشه ای معنی دار بود. محيط كشت MS بيش­ترين ميزان رشد، توسعه برگي و طول ميانگره را نسبت به محيط کشت QL و QL تغييريافته داشته و محيط کشت QL در مقايسه با محيط کشت MS داراي ميزان پرآوري بيش­تر و تعداد برگ بيش­تر بود و در نتيجه مشخص گرديد که محيط کشت MS براي رشد پايه FOX11 و محيط کشت QL براي رشد پايه  OH×F40مناسب مي‌باشد.

در ادامه به منظور ارزيابي دقيق‌تر محيط‌هاي كشت در آزمايش دوم، چهار سطح تنظیم کننده‌های رشد از غلظت‌هاي مختلف تنظیم کننده‌های رشد و دو پايه پاکوتاه‌کننده گلابي در دو محيط كشت مورد آزمايش قرار گرفت و صفات ميزان رشد، پرآوري، تعداد برگ، توسعه برگ و کالوس مورد بررسي قرار گرفتند که براساس نتايج بدست آمده از آزمايش دوم،‏ اختلاف معني‌داري از لحاظ میزان رشد در غلظت های مختلف تنظیم کننده های رشد مشاهده گردید.

ميزان رشد و پرآوري در تنظیم کننده‌های رشد با غلظت 1/0 ميلي‌گرم بر ليترNAA  و 1 ميلي‌گرم بر ليتر 2iP و 2 ميلي‌گرم بر ليترBAP  پايه گلابي OH×F40 در محيط کشت QL از ساير غلظت‌ها بيش­تر بود. جدول تجزيه واريانس و مقايسه‌ ميانگين نشان داد كه بين غلظت‌هاي مختلف تنظیم کننده‌های رشد  و دو پايه هيبريد گلابي در سطح 5% اختلاف معني‌داري از لحاظ متوسط ميزان کالوس وجود ندارد. در آزمايش سوم به بررسي توان ريشه‌زايي تحت تاثير غلظت‌هاي مختلف از تنظيم‌کننده‌هاي رشد طبيعي و مصنوعي پرداخته شد و صفاتي نظير درصد ريشه‌زايي، کيفيت ريشه، طول ريشه، تعداد برگ، ميزان توليد کالوس و سياه‌شدگي انتهايي مورد بررسي قرار گرفت و اختلاف معنی داری بین غلظت های مختلف IBA بر درصد ریشه زایی در بین پایههای پاکوتاه کننده گلابی مورد استفاده وجود داشت. غلظت 1 و 2 ميلي‌گرم بر ليتر از تنظیم کننده‌های رشد   IBA بهترين ريشه‌زايي را در ريزقلمه‌ها تحت تيمار كوتاه مدت ايجاد كرد.

مقدمه پایان نامه تهیه پروتکل ریز ازدیادی و تولید نیمه انبوه دو پایه پا کوتاه کننده گلابی OH×F40 و FOX11 :

گلابي يکي از درختان ميوه مهم مناطق معتدله محسوب مي‏شود و اگرچه تکثير آن به طرق مختلفي امکان‌پذير است، ولي معرفي عملي‏ترين و اقتصادي‏ترين روش تکثير آن مستلزم شناخت همه روش‏هاي ازدياد از جمله روش‏هاي تکثير درون‌شيشه ‏اي است (روزبان و همکاران، 1381). اين گياه بومي آسياي غربي و اروپاي شرقي مي‌باشد (Nee et al., 2002). گلابي معمولي يا گلابي اروپايي از گونه communis مي‌باشد که ميوه‌هاي آبدار با دانه‌هاي سنگي و اغلب شکل کشيده دارد، اما گلابي آسيايي شکلي شبيه به سيب دارد (Potter et al., 2007).گلابي از حدود يک هزار سال پيش از ميلاد مسيح در يونان زير کشت در آمده و در حال حاضر، پس از سيب، مهم‌ترين ميوه دانه‌دار دنيا و ايران به شمار مي‌آيد (Jules and James, 1996). تعداد گونه‌هاي جنس Pyrus هنوز به طور کامل و دقيق مشخص نيست، اما تاکنون 60 گونه در اين جنس معرفي شده است (Krichkov and Potanov, 1998) که اکثر آن‌ها بومي آسيا يا اروپا و فاقد ميوه خوراکي مي‌باشند و تنها به عنوان پايه‌اي براي گلابي معمولي به کار مي‌روند، که بيست و شش گونه شناخته شده از جنس گلابي و پراکنش جغرافيايي آنها در جدول 1-1 آورده شده است.  11 گونه مختلف از جنس Pyrus در ايران وجود دارد (Westwood and Bjornstad, 1971، خاتم ساز 1371).

گلابي از ميوه‌هاي دانه‌دار به شمار مي‌آيد (Jules and James, 1996). کليه گونه‌هاي جنس گلابي در منطقه معتدله نيمکره شمالي دنياي قديم پراکنده شده‌اند (Tatarintseva, 1981). کليه ارقام و ژنوتيپ‌هاي گونهPyrus communis  در 5 زيرگونه و در 5 منطقه، حوالي قفقاز (اوستيا و گرجستان) آسياي ميانه، اروپاي غربي، اروپاي شرقي و اروپاي جنوبي قرار گرفته‌اند. علاوه بر اين گروه، ارقام و ژنوتيپ‌هاي خاور دور از گلابي‌هاي (P. ussuriensis Maxim, P. calleryana و P. betulifolia ) منشاء گرفته‌اند (Krichkov and Potanov, 1998). گلابي معمولي (Pyrus communis) در منطقه قفقاز، روسيه، آسيا، اروپاي جنوبي و مرکزي پراکنده شده است (Kolesnicova, 1997).

اين گونه از لحاظ مقاومت زمستانه، اندازه درخت و ديگر صفات مورفولوژيکي و بيولوژيکي داراي تنوع بسيار بوده و تصور بر اين است که تعداد بسيار زيادي از ارقام تحت کشت در آسيا، قفقاز و اروپا از اين گونه بوجود آمده است (Krichkov and Potanov, 1998). ژوکوفسکي معتقد است، منطقه قفقاز و بخش‌هاي غربي ايران يکي از اولين مراکز تنوع گونه‌ها و ارقام تحت کشت گلابي است (Jookovskiy, 1950). گلابي‌هاي آسيا و آسياي صغير به عنوان پايه بکار برده مي‌شوند نه به عنوان رقم قابل مصرف (Chalices and westwood, 1973 and Westwood, 1971 ). در انواع وحشي گونهPyrus communis قدرت رشد بسيار زياد است که مي‌تواند منبع با ارزشي به عنوان پايه براي ارقام تحت کشت باشد (Kolesnicova, 1997).

گياه‌شناسي گلابي:

برگ‌هاي درخت گلابي اره‌اي مضرس هلالي يا با كناره صاف و به ندرت كنگره‌اي، جوانه‌ها در داخل از پهنا پيچيده و دمبرگ‌ها داراي گوشوارك‌هاي كم و بيش بزرگي مي‌باشند و فلس جوانه روي هم خوابيده و گل‌ها همزمان يا كمي قبل از جوانه‌هاي برگ ‌باز مي‌شوند (عبداللهي، 1388). گل‌ها خوشه‌اي، چترمانند، سفيد به ندرت در برخي گونه‌ها و يا ژنوتيپ‌هاي وحشي صورتي و يا رگه‌هاي صورتي رنگ در آنها مشهود است. كاسبرگ‌ها به عقب برگشته يا گسترده و گلبرگ‌ها داراي قاعده دمبرگ‌‌مانند مي‌باشند. گلبرگ‌ها تا حدودي مدور تا مستطيلي پهن بوده و 20 تا 30 پرچم‌ را در بر گرفته‌اند. بساک‌ها قرمز تا ارغواني و 2 تا 5 خامه آزاد در قاعده به وسيله ديسك يك‏جا جمع مي‌شوند. تخمك‌ها به تعداد دو عدد در هر خانه و ميوه پوم كروي تا گلابي شكل است و كاسه گل پايا يا خزان‌كننده و گوشت ميوه وابسته به رقم يا ژنوتيپ درصدهاي متفاوتي را از سلول‌هاي اسكلروئيدي دارا مي‌باشند. بذور رسيده گلابي قهوه‌اي تا سياه و در برخي گونه‌هاي اين جنس بسيار بزرگ‌تر از بذر گلابي‌هاي اروپايي است (عبداللهي، 1385).

از نظر گرده‌افشاني و تشكيل ميوه، تقريبا همه ارقام گلابي خودناسازگار و دگرباورند. اگرچه بعضي از ارقام گلابي در برخي شرايط آب و هوايي توليد ميوه بدون بذر مي‌كنند، با اين وجود بهترين عملكرد هنگامي است كه درخت گرده‌زا در بين ارقام اصلي كشت شده باشد (Westwood, 1993). درخت گلابي در برابر سرما از سيب حساس‌تر است و گل‌هاي گلابي در بهار کمي زودتر از سيب باز مي‌شوند. به همين دليل بیشتر در معرض خطر سرماي بهاره قرار مي‌گيرند (عبداللهي، 1385) .در تابستان گیاه گلابی گرما را بیشتر از سیب تحمل می کند. گل و ميوه گلابي در انتهاي شاخه‌ها و اسپورهای دو ساله بوجود مي‌آيد، بنابراين هنگام هرس درختان بارور، بايد در حفظ اسپورها دقت کرد. ميزان محصول گلابي در باغ‌هاي معمولي به 45 تن در هکتار مي‌رسد و تعداد ارقام گلابي موجود در ايران حدود 120 نوع است (محمودزاده و ابراهيميان، 1390).

فهرست مطالب

چکیده 1

فصل اول: مقدمه  2

1-2- گیاه شناسی گلابی 7

1-3- ازدیاد و تکثیر گلابی 8

1-4- کشت بافت گیاهی 9

1-4-1- تعریف ریزازدیادی 13

1-5- انواع کشت بافت گیاهی 14

1-6- مزایای کشت بافت گیاهی 16

1-6-1- تولید گیاهان هاپلوئید 17

1-6-2- امتزاج پروتوپلاست 17

1-6-3- ریزپیوندی 18

1-6-4- تولید و استخراج متابولیت های ثانویه 18

1-7- ترکیب محیط های کشت بافت  19

1-8-تنظیم کنندههای رشدگیاهی در کشت بافت  21

1-8-1- چرخه های رشد گیاه  22

1-9- ایجاد کشت عاری از بیماری  23

1-10- محیط های کشت اولیه و شرایط کشت  23

فصل دوم:  (مروری بر مطالعات گذشته)  25

2-2- استفاده از روش کشت بافت گیاهی در گلابی  25

3-2- شاخه رویی و پرآوری شاخه ها در گلابی  32

فصل سوم:  (مواد و روش ها 37

3-2- نحوه انجام آزمایش  37

3-3- مراحل مختلف و موارد مورد بررسی در آزمایش  38

3-3-1- تهیه محلول استوک  38

3-3-2- ساخت یک لیتر محیط کشت 38

3-3-3- ارزیابی محیط های پایه مختلف 39

3-3-4- آماده سازی نمونه های گیاهی 39

3-3-5- محیط های کشت در نظر گرفته شده 39

3-3-6- استقرار ریزنمونه ها 40

3-3-7- شرایط اتاقک رشد 40

3-3-8- ارزیابی اثر غلظتهای مختلف هورمونی 40

3-3-9- ارزیابی توان ریشه زایی 41

3-3-10- جمع آوری و تجزیه و تحلیل داده ها 42

فصل چهارم: (نتایج و بحث 43

4-1- نتايج و ارزيابي اثر سه نوع محيط كشت بافت گياهي بر واکنش رويشي جداکشت‌ها 43

4-1-1- ميزان رشد 43

4-1-2- پرآوري  44

4-1-3- متوسط تعداد برگ  45

4-1-4- ميزان توسعه برگ  45

4-1-5- متوسط طول ميانگره  46

4-1-6- ميزان نكروز 47

4-2- نتايج ارزيابي اثر چهار غلظت از ترکيبات مختلف هورموني بر روي برخي صفات رويشي گلابي (آزمايش دوم) 49

4-2-1- ميزان رشد  50

4-2-2- ميزان پرآوري  52

4-2-3- متوسط تعداد برگ 53

4-2-4- ميزان توسعه برگ 55

4-2-5- متوسط ميزان کالوس 56

4-3- نتايج ارزيابي توان ريشه‌زايي (آزمايش سوم)……. 59

4-3-1- توسعه کالوس 59

4-3-2- درصد ريشه‌زايي 61

4-3-3- متوسط طول ريشه 63

4-3-4- كيفيت ريشه 65

4-3-5- تعداد برگ 66

4-3-6- سياه‌شدگي انتهايي 68

4-4- نتیجه گیری کلی 70

4-5- پیشنهادات 70

منابع 71

چکیده انگلیسی  76

فهرست جداول

جدول 1-1- بيست و شش گونه شناخته شده از جنس گلابي و پراکنش جغرافيايي جدول 3

جدول 3-1- غلظت های مختلف تنظیم کننده های رشد مورد استفاده در آزمایش دوم 41

جدول 4-1: تجزيه واريانس اثر سه نوع محيط کشت بافت گياهي (QL، MQL و MS)روي دو پايه گلابي 48

جدول 4-2: مقايسه ميانگين اثر سه نوع محيط کشت (QL، MQL و MS) بر روي دو پايه  گلابي در شرايط درون شيشه‎اي       49

جدول 4-3: تجزيه واريانس اثر چهار غلظت از ترکيبات مختلف هورمون‌هاي رشد بر روي برخي صفات رويشي پايه گلابي FOx­-11 در محيط کشت MS  58

جدول 4-4:مقايسه ميانگين اثر چهار غلظت از ترکيبات مختلف هورمون‌هاي رشد بر روي برخي صفات رويشي پايه گلابي FOx­-11 در محيط کشت MS 58

جدول 4-5: تجزيه واريانس اثر چهار غلظت از ترکيبات مختلف هورمون‌هاي رشد بر روي برخي صفات رويشي پايه گلابي OH×F40 در محيط کشت QL 59

جدول 4-6: تجزيه واريانس بررسي صفات رويشي دو پايه گلابي 69

جدول 4-7: مقايسه ميانگين بررسي صفات رويشي 69

جدول 4-8: مقايسه ميانگين بررسي صفات رويشي 69

فهرست شکل­ها

نمودار 4-1- مقايسه اثر سه نوع محيط کشت (MS، QL و MQL) بر طول گياهچه ريزنمونه هاي دو پايه گلابي در شرايط درون شيشه ‏اي 43

نمودار 4-2- مقايسه اثر سه نوع محيط کشت (MS، QL و MQL) بر ميزان پرآوري دو پايه گلابي در شرايط درون شيشه ‏اي      44

نمودار 4-3- مقايسه اثر سه نوع محيط کشت (MS، QL و MQL) بر متوسط تعداد برگ در دو پايه گلابي در شرايط درون شيشه ‏اي        45

نمودار 4-4- مقايسه اثر سه نوع محيط کشت (MS، QL و MQL) بر متوسط توسعه برگ در دو پايه گلابي در شرايط درون شيشه ‏ای       46

نمودار4-5- مقايسه اثر سه نوع محيط کشت (MS، QL و MQL) بر ميانگين طول ميانگره در دو پايه گلابي در شرايط درون شيشه ‏اي      47

نمودار 4-6- مقايسه اثر سه نوع محيط کشت (MS، QL و MQL) بر ميزان نکروز در دو پايه گلابي در شرايط درون شيشه ‏اي   48

نمودار 4-7- مقايسه اثر چهار غلظت هورمون‌هاي رشد 2ip،  BAPو NAA بر ميزان رشد پايه FOX-11…………………………………. 51

نمودار 4-8- مقايسه اثر چهار غلظت هورمون‌هاي رشد 2ip،  BAPو NAA بر ميزان رشد پايه OHxF40……………………………. 51

نمودار 4-9- مقايسه اثر چهار غلظت هورمون‌هاي رشد 2ip،  BAPو NAA بر ميزان پرآوري پايه گلابي FOX-11……………. 52

نمودار 4-10- مقايسه اثر چهار غلظت هورمون‌هاي رشد 2ip،  BAPو NAA بر ميزان پرآوري پايه گلابي OHxF40…. 53

نمودار 4-11- مقايسه اثر چهار غلظت هورمون‌هاي رشد 2ip،  BAPو NAA بر ميزان تعداد برگ پايه گلابي FOX-11….. 54

نمودار 4-12- مقايسه اثر چهار غلظت هورمون‌هاي رشد 2ip،  BAPو NAA بر ميزان تعداد برگ پايه گلابي OHxF40

54

نمودار 4-13- مقايسه اثر چهار غلظت هورمون‌هاي رشد 2ip،  BAPو NAA بر ميزان توسعه برگ بر پايه گلابي FOX-11           55

نمودار 4-14- مقايسه اثر چهار غلظت هورمون‌هاي رشد 2ip،  BAPو NAA بر ميزان توسعه برگ بر پايه گلابي OHxF40          56

نمودار 4-15- مقايسه اثر چهار غلظت هورمون‌هاي رشد 2ip،  BAPو NAA بر ميزان توسعه کالوس بر پايه گلابي FOX-11        57

نمودار 4-16- مقايسه اثر چهار غلظت هورمون‌هاي رشد 2ip،  BAPو NAA بر ميزان توسعه کالوس بر پايه گلابيOHxF4          57

شکل 4-17- مقايسه اثر سه غلظت IBA بر ميانگين ميزان توسعه کالوس در پايه گلابيFOx­-11 60

شکل 4-18- مقايسه اثر سه غلظت IBA بر ميانگين ميزان توسعه کالوس در پايه گلابي OH×F40 60

نمودار 4-19- مقايسه اثر سه غلظت IBA بر درصد ريشه‏زايي پايه گلابي FOx­-11 62

نمودار 4-20- مقايسه اثر سه غلظت IBA بر درصد ريشه‏زايي پايه گلابي OH×F40 62

نمودار 4-21- مقايسه اثر سه غلظت IBA بر ميانگين طول ريشه پايه گلابيFOx­-11 64

نمودار 4-22- مقايسه اثر سه غلظت IBA بر ميانگين طول ريشه پايه گلابي OH×F40 64

نمودار 4-23- مقايسه اثر سه غلظت IBA بر کيفيت ريشه پايه گلابي FOx­-11 65

نمودار 4-24- مقايسه اثر سه غلظت IBA بر کيفيت ريشه پايه گلابي OH×F40 66

شکل 4-25- مقايسه اثر سه غلظت IBA بر ميانگين تعداد برگ پايه گلابي FOx­-11 67

شکل 4-26- مقايسه اثر سه غلظت IBA بر ميانگين تعداد برگ پايه گلابي OH×F40 67

شکل 4-27- مقايسه اثر سه غلظت IBA بر ميانگين ميزان سياه‌شدگي انتهايي در پايه گلابيFOx­-11 68

شکل 4-28- مقايسه اثر سه غلظت IBA بر ميانگين ميزان سياه‌شدگي انتهايي در پايه گلابي OH×F40 68

راهنمای خرید و دانلود فایل

برای پرداخت، از کلیه کارتهای عضو شتاب میتوانید استفاده نمائید.

بعد از پرداخت آنلاین لینک دانلود فعال و نمایش داده میشود ، همچنین یک نسخه از فایل همان لحظه به ایمیل شما ارسال میگردد.

در صورت بروز  هر مشکلی،میتوانید از طریق تماس با ما  پیغام بگذارید و یا در تلگرام با ما در تماس باشید، تا شکایت شما مورد بررسی قرار گیرد.

برای دانلود فابل روی دکمه خرید و دانلود  کلیک نمایید.